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小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展

 时间:2021-08-20
        单克隆抗体市场持续高速增长,其中用于免疫检测分析和疾病早期筛查的单克隆抗体,包括新冠病毒中和抗体,都可以通过小鼠杂交瘤细胞来制备。小鼠杂交瘤单克隆抗体的快速制备受到很多因素的影响。其中,能否快速富集和筛选效应B细胞、提高B细胞与骨髓瘤细胞的融合率、实现目标杂交瘤细胞的快速筛选,是实现快速制备的技术关键。
        水琴等作者重点介绍了杂交瘤融合技术、阳性杂交瘤分选技术方面的研究进展,这两个关键环节的技术进展对提高制备效率有一定贡献。开发进一步提高杂交瘤融合率的方法、新的阳性杂交瘤快速筛选技术和实现单克隆抗体性能的快速评价,是下一步需要努力的方向。
标题
小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展
作者
方水琴,刘程,马俊飞,闫帅帅,许东坡,刘箐
引用
方水琴, 刘程, 马俊飞, 等. 小鼠杂交瘤单克隆抗体快速制备技术研究进展. 生物工程学报, 2021, 37(7): 2293-2306.
摘要:小鼠杂交瘤单克隆抗体来源稳定、后期易制备、产量高,是免疫学中使用最为普遍的抗体。传统的耗时费力的杂交瘤制备技术无法满足日益增长的市场需求。文中从抗原设计筛选、B细胞富集与筛选、骨髓瘤细胞的改造、融合技术的改进、阳性杂交瘤细胞筛选及单克隆抗体性能快速测定中所涉及的快速制备技术方面进行阐述,以期为系统化的小鼠杂交瘤单克隆抗体的快速制备方法提供参考。

图1  小鼠杂交瘤融合示意图

图2  修饰后的瘤细胞用于抗原特异性筛选、交叉反应性筛选、亚型特异性筛选示意图

图3  细胞膜荧光免疫吸附测定法原理图 (A) 及操作过程示意图 (B)

图4  微雕刻后玻片上两种抗体测定方法 (A:二抗捕获抗体,与标记的抗原结合;B:微阵列显微照片;C:在B中用白框标记的区域的扩展视图和相应微孔的相位对比图像;D:包被抗原捕获抗体,与标记的二抗结合;E:抗体阵列的荧光显微图及相应微孔的相衬图像)

 
图5  微流控芯片用于杂交瘤筛选方法示意图

图6  流式细胞仪用于抗原特异性杂交瘤示意图 (1:半抗原和IgG对杂交瘤的识别;2:流式细胞仪对具有双荧光信号的杂交瘤的分选;3:间接ELISA对杂交瘤上清的阳性测试)

图7  ClonePix FL筛选杂交瘤流程图 (A:ClonePix FL仪器外观;B:半固体中杂交瘤在可见光和紫外光下的图片;C:ClonePix FL循环筛选过程)

图8  细菌宏阵列原理示意图
图9  新冠病毒胶IgM-IgG联合抗体快速检测示意图

图10  电容式免疫传感器设计原理图及工作原理
 

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